DIGITALIZACIÓN DEL FOTÓN

 El viaje de un fotón al archivo digital

La detección precisa de la luz emitida por fluorocromos es fundamental en la citometría de flujo (CF). El fascinante viaje de un fotón de luz, desde su emisión hasta su conversión en un dato numérico dentro de un archivo FCS (del inglés Flow Cytometry Standard), es el tema central que explicaremos en las siguientes secciones. Este proceso, esencial en la CF, involucra una serie de transformaciones físicas que merecen nuestra atención.

Comenzaremos por profundizar en los principios físicos que rigen la captación de fotones (Figura 1). Inicialmente, un fotón es liberado por una molécula de fluorocromo excitada. Este fotón, que porta información sobre las características de la célula o partícula en estudio, es capturado por un detector especializado, comúnmente un PMT (del inglés Photo Multiplier Tube). Este dispositivo multiplica el número de electrones generados de manera lineal y proporcional a la intensidad de la luz incidente, asegurando que incluso las señales más débiles sean detectables. La intensidad de cada señal se mide en un instante dado, y esta señal se transforma en un valor digital discreto a través del ADC (del inglés Analog-to-Digital Converter). Finalmente, los valores digitales obtenidos en el proceso de conversión se almacenan en un archivo de formato FCS.

Figura 1. De la luz al dato numérico.
Figura generada con la 🤖 de chatGPT o4-mini-high

🚨🚨 No todos los citómetros de flujo tienen PMTs; algunos utilizan fotodiodos o una combinación de fotodiodos y PMTs. Aunque el resultado final, la conversión de la señal analógica a digital, es el mismo, los principios físicos involucrados son ligeramente diferentes.

Creado con 🤖 por Jairo Villanueva